Tobramycin

Tobramycinum

 

C₁₈H₃₇N₅O₉                                                                                          P.t.l: 467,5

Tobramycin laø 4-O-(3-Amino-3-deoxy-a-D-glucopyranosyl)-2-deoxy-6-O-(2,6-diamino-2,3-6-trideoxy-a-D-ribo-hexopyranosyl)-L-streptamin, đöôïc ñieàu cheá töø Streptomyces tenebrarius hoaëc baèng caùc phöông phaùp khaùc, hoaït löïc khoâng ñöôïc ít hôn 930 I.U / mg, tính theo cheá phaåm ñaõ laøm khoâ vaø khoâng chöùa 2-methyl-1-propanol.

Tính chaát 

Boät traéng hoaëc gaàn nhö traéng. Deã tan trong nöôùc, raát khoù tan trong ethanol 96%, thöïc teá khoâng tan trong ether.

Ñònh tính

A.   Saéc kyù lôùp moûng (Phuï luïc 5.4)

Baûn moûng: Silica gel (TT).

Dung moâi trieån khai: Methylen clorid - amoniac ñaäm ñaëc - methanol (17 : 33 : 50).

Dung dòch thöû: Hoøa tan 20 mg cheá phaåm trong nöôùc vaø pha loaõng thaønh 5,0 ml vôùi cuøng dung moâi.

Dung dòch ñoái chieáu (1): Hoøa tan 20,0 mg tobramycin chuaån (ÑC) trong nöôùc vaø pha loaõng thaønh  5,0 ml vôùi cuøng dung moâi.

Dung dòch ñoái chieáu (2): Hoøa tan 4,0 mg neomycin sulfat chuaån (ÑC) vaø 4,0 mg kanamycin monosulfat chuaån (ÑC) trong 1 ml dung dòch ñoái chieáu (1).

Caùch tieán haønh:

Chaám rieâng reõ 5 µl caùc dung dòch treân leân baûn moûng. Trieån khai saéc kyù ñeán khi dung moâi ñi ñöôïc ñöôïc khoaûng 15 cm. Laøm khoâ baèng khoâng khí noùng. Phun thuoác thöû phaùt hieän baèng hoãân hôïp ñoàng theå tích cuûa dung dòch 1,3-dihydroxynaphtalen 0,2% trong ethanol 96% (TT) vaø dung dòch acid sulfuric 46,0%. Saáy baûn moûng ôû 105 ^oC trong 5 - 10 phuùt.

Treân saéc kyù ñoà, veát chính thu ñöôïc töø dung dòch thöû phaûi töông ñöông veà vò trí, maøu saéc vaø kích thöôùc so vôùi veát chính thu ñöôïc töø dung dòch ñoái chieáu (1). Pheùp thöû chæ coù giaù trò khi saéc kyù ñoà thu ñöôïc töø dung dòch ñoái chieáu (2) coù 3 veát chính taùch nhau roõ raøng.

B.  Hoøa tan khoaûng 5 mg cheá phaåm trong 5 ml nöôùc. Theâm tieáp 5 ml dung dòch ninhydrin 0,1% pha trong ethanol 96% (TT), vaø ñun trong caùch thuûy 3 phuùt. Maøu xanh tím xuaát hieän.

pH

Töø 9,0 ñeán 10,0 (Phuï luïc 6.2).

Hoøa tan 1,0 g cheá phaåm trong 10 ml nöôùc khoâng coù carbon dioxyd (TT).

Goùc quay cöïc rieâng

Töø +138 ñeán +148 (tính theo chaát ñaõ laøm khan khoâng coù 2-methyl-1-propanol) (Phuï luïc 6.4)

Hoøa tan 1,0 g cheá phaåm trong nöôùc vaø pha loaõng thaønh 25,0 ml vôùi cuøng dung moâi.

Taïp chaát lieân quan

Tieán haønh theo phöông phaùp saéc kyù lôùp moûng (Phuï luïc 5.4)

Baûn moûng: Silica gel (TT).

Dung moâi trieån khai: Amoniac ñaäm ñaëc - 2-butanon - ethanol 95% (1 : 1 : 1)

Dung dòch thöû : Dung dòch 0,80% (kl/tt) cheá phaåm trong dung dòch amoniac 0,02 M.

Dung dòch ñoái chieáu: Dung dòch 0,008% (kl/tt) cheá phaåm trong dung dòch amoniac 0,02 M.

Caùch tieán haønh: Chaám rieâng bieät 5 µl moãi dung dòc. Trieån khai saéc kyù ñeán khi dung moâi ñi ñöôïc 12 cm. Laáy baûn moûng ra vaø ñeå khoâ ngoaøi khoâng khí, laøm noùng ñeán 110 ^oC trong 10 phuùt. Phun baûn moûng khi coøn noùng vôùi dung dòch ñöôïc pha ngay tröôùc khi duøng, baèng caùch pha loaõng dung dòch natri hypoclorid (3% clor) vôùi nöôùc ñeå ñöôïc dung dòch chöùa 0,5% clor (kl/tt). Laøm khoâ baûn moûng trong luoàng khoâng khí laïnh vaø khoâ cho ñeán khi phaàn dieän tích ñöôïc phun thuoác thöû ôû phía döôùi vaïch chaám saéc kyù chæ cho maøu xanh raát nhaït vôùi 1 gioït dung dòch hoà tinh boät coù kali iodid (TT); traùnh ñeå laâu ngoaøi khoâng khí laïnh. Phun baûn moûng vôùi dung dòch hoà tinh boät coù kali iodid  (TT). Baát cöù veát phuï naøo xuaát hieän treân saéc kyù ñoà cuûa dung dòch thöû khoâng ñöôïc ñaäm maøu hôn veát thu ñöôïc cuûa dung dòch thöû ñoái chieáu.

2-Methyl-1-propanol

Khoâng ñöôïc quaù 1,0% (kl/kl) (Phuï luïc 10.14, heä B).

Nöôùc

Khoâng ñöôïc quaù 8,0 % (Phuï luïc 10.3).

Duøng 0,30 g cheá phaåm.

Tro sulfat

Khoâng quaù 0,3 % (Phuï luïc 9.9; Phöông phaùp 2).

Duøng 1,0 g cheá phaåm.

Ñoä voâ khuaån

Neáu duøng cho saûn xuaát thuoác tieâm hoaëc thuoác nhoû maét daïng phaân lieàu, khoâng coù theâm giai ñoaïn tieät truøng thích hôïp trong qui trình saûn xuaát, cheá phaåm phaûi ñaït chæ tieâu naøy (Phuï luïc 13.7).

Noäi ñoäc toá vi khuaån

Khoâng ñöôïc quaù 2,0 I.U /mg. 

Neáu duøng cho saûn xuaát daïng pha tieâm theo qui trình khoâng coù theâm giai ñoaïn thích hôïp ñeå loaïi boû noäi ñoäc toá vi khuaån, cheá phaåm phaûi ñaït chæ tieâu naøy (Phuï luïc 13.2).

Ñònh löôïng

Ñònh löôïng theo phöông phaùp xaùc ñònh hoaït löïc khaùng sinh baèng phöông phaùp thöû vi sinh vaät (Phuï luïc 13.9).

Baûo quaûn

Neáu cheá phaåm ñaõ ñöôïc tieät khuaån, phaûi baûo quaûn trong loï kín ñaõ ñöôïc tieät khuaån.

Nhaõn

Saûn phaåm ñaït giôùi haïn voâ khuaån.

Saûn phaåm ñaït giôùi haïn noäi ñoäc toá vi khuaån.